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PCR实验中封板膜使用指南及问题解决方案
来源:爱赛因 | 作者:佚名 | 发布时间 :2025-11-26 | 49 次浏览: | 分享到:
PCR实验中封板膜使用指南及问题解决方案,封板膜,广泛应用于PCR实验中,其作用是封闭PCR板,减少实验过程中的污染,并提高实验的准确性。96/384孔板在PCR、qPCR、ELISA、细胞培养、长期储存以及自动化工作站处理等实验中发挥着至关重要的作用。它确保封板膜与孔板紧密贴合,有效防止液体蒸发。

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  一、封板膜的正确操作步骤

  贴膜‌

  取出封板膜后立即重新密封自封袋,保持无酶环境‌。

  撕掉底衬,将粘性面一端对齐PCR板边缘,缓慢拉平至另一端,避免偏移或产生气泡‌。

  若为单端标签膜,先锚固一端再逐步撕衬纸;双端标签膜需平滑剥离中心衬纸。



  压膜‌

  使用压膜板或光滑卡片(如银行卡),沿水平和垂直方向各刮压2次,确保边缘和孔间缝隙完全密封‌。

  施力需坚定但不过度,避免压坏板或导致液体溢出‌。



  检查‌

  目视检查每个孔周边是否无间隙,封板膜表面无褶皱或液体残留‌。

  密封后静置10分钟,使粘合剂充分固化‌。


  二、关键注意事项

  防污染‌:全程戴无粉手套,避免接触粘性面或孔口‌。

  适配性‌:qPCR需选择高透光率(≥86%)、耐温-20℃~120℃的封板膜,避免信号干扰‌。

  密封性‌:96孔板可能存在公差变形,需多次刮压确保无漏液‌。

  材质选择‌:普通PCR膜透光性较差,qPCR专用膜需为四切角设计‌。

  三、常见问题解决方案

  信号弱‌:检查封板膜是否与qPCR仪光路匹配(如白色耗材增强反射)‌。

  蒸发率高‌:优先选择压敏型封板膜,蒸发率需≤3%(尤其小体系样本)‌。

  封膜不牢‌:重新刮压边缘或更换高粘性封板膜‌。

  污染处理‌:若发现污染,立即更换封板膜并清洁板面。

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