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ELISA检测试剂盒的实验步骤有哪些?
来源: | 作者:佚名 | 发布时间 :2025-12-08 | 79 次浏览: | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ | 分享到:
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  ELISA检测试剂盒的实验步骤有哪些?


  ELISA检测试剂盒的实验步骤主要包括以下几个关键环节:

  样本准备‌:血清/血浆样本需静置后离心取上清;组织样本需匀浆处理。

  加样反应‌:每孔加入标准品或待测样本,37℃孵育90分钟,使抗原与包被抗体充分结合。

  洗涤‌:弃去反应液,用洗涤缓冲液洗板5次,彻底去除未结合物质。

  加酶标抗体‌:每孔加入酶标抗体,37℃孵育60分钟,形成夹心复合物。


  再次洗涤‌:同步骤3,确保背景干净。

  显色‌:每孔加入底物溶液(TMB),37℃避光孵育15分钟左右。

  终止与测定‌:加入终止液终止反应,立即用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值。

  注意事项‌:洗板需彻底但避免过度;显色时间严格控制;不同批号试剂不可混用。标准曲线R²应≥0.99,回收率在85%-115%范围内为合格。

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