小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)Elisa试剂盒使用说明
小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)Elisa试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞上清或组织匀浆中的Aβ蛋白含量，应用于(AD)相关科研研究。爱赛因试剂盒
检测原理
采用双抗体夹心法ELISA：
微孔板预包被特异性抗小鼠Aβ抗体，样本中Aβ蛋白与抗体结合后，再加入HRP标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入TMB底物显色，颜色深浅与Aβ浓度成正比，450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算浓度。
样本处理方法
血清：采集后室温静置2小时或4℃过夜，3000×g离心10分钟取上清。
血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，30分钟内3000×g离心30分钟取上清。
细胞上清液：3000×g离心10分钟去除颗粒物。
组织匀浆：用预冷PBS冲洗组织，按1:9比例加入PBS研磨，5000×g离心5–10分钟取上清。
保存：若不立即检测，样本应分装冻存于-20℃，避免反复冻融。
注意：样本中不得含NaN₃，因其会抑制HRP酶活性，影响检测结果。
试剂盒组成(以96T为例)
组分 规格
酶标包被板 12孔×8条
标准品 0.5ml×1瓶(原倍)
样品稀释液 6ml
酶标试剂(HRP标记抗体) 6ml
显色剂A/B液 各6ml
终止液 6ml
30倍浓缩洗涤液 20ml
封板膜 & 密封袋 各2张/1个
操作步骤简要
标准品稀释：按说明书梯度稀释，如150μl原倍标准品+150μl稀释液得5号标准品。
加样：标准品50μl/孔;待测样本先加40μl稀释液+10μl样本(终稀释5倍)。
37℃温育30分钟，封板膜密封。
洗涤5次：每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，拍干残留液体。
加酶标试剂50μl/孔(空白孔除外)，再次温育并洗涤。
显色：每孔加显色剂A、B液各50μl，37℃避光显色10–15分钟。
终止反应：每孔加终止液50μl，颜色由蓝变黄。
测定OD值：450nm波长读数，建议在终止后15分钟内完成。
结果计算
绘制标准曲线(浓度为横坐标，OD值为纵坐标)。
根据样本OD值查得对应浓度，再乘以稀释倍数(如5倍或更高)即为实际浓度。
提示：每次实验建议做复孔，提高数据准确性;试剂使用前需恢复至室温(20–25℃)。
注：以上仅供参考，不作为实验依据，具体请联系品牌或技术老师!
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